限制性凝血酶的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610107662.8 申請日 -
公開（公告）號 CN105624134A 公開（公告）日 2016-06-01
申請公布號 CN105624134A 申請公布日 2016-06-01
分類號 C12N9/74(2006.01)I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃宏寶;黃發(fā)燦;鄭登忠;郭曉乾;章麗麗 申請（專利權）人 福建華燦制藥有限公司
代理機構 福州市鼓樓區(qū)博深專利代理事務所（普通合伙） 代理人 福建華燦制藥有限公司
地址 365000 福建省三明市三元區(qū)荊東工業(yè)園32號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種純度高、比活高的限制性凝血酶的制備方法，利用陰離子交換層析介質從豬血漿中吸附凝血酶原，對陰離子層析柱進行洗脫，活化凝血酶原，得凝血酶粗溶液，經(jīng)超濾濃縮，得凝血酶濃縮液，再用陽離子交換層析介質吸附凝血酶，對陽離子層析柱進行洗脫，得凝血酶溶液，經(jīng)超濾脫鹽濃縮，最后凍干得限制性凝血酶成品。本發(fā)明的有益效果在于：利用豬血制備限制性凝血酶，有利于充分利用豬血資源，減少環(huán)境污染；在常溫常壓下即可制備限制性凝血酶，減少設備投資；制備得到的限制性凝血酶純度高，可達到電泳純，可用于酶切GST融合蛋白；操作簡單，僅需離心、上樣層析、超濾和凍干等幾個步驟，容易實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)。