一種L-天冬氨酸β-脫羧酶產(chǎn)生菌的高通量篩選方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201410654586.3 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN105648036B 公開（公告）日 2020-05-19
申請(qǐng)公布號(hào) CN105648036B 申請(qǐng)公布日 2020-05-19
分類號(hào) C12Q1/527;C12Q1/04;C12R1/40 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 李東升;傅風(fēng)華;張淑敏;楊小平 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 山東國(guó)際生物科技園發(fā)展有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 264670 山東省煙臺(tái)市高新區(qū)科技大道39號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種L?天冬氨酸β?脫羧酶產(chǎn)生菌的高通量篩選方法。該方法包括如下步驟：1)采用富集培養(yǎng)基對(duì)樣品中的微生物進(jìn)行富集培養(yǎng)與初步分離；2)然后將平板分離得到的單菌落接種96微孔板初篩半固體培養(yǎng)基，初篩得到L?天冬氨酸β?脫羧酶產(chǎn)生菌；3)對(duì)初篩得到的菌株接種24孔板液體培養(yǎng)，結(jié)合紙層析法復(fù)篩得到L?天冬氨酸β?脫羧酶高產(chǎn)菌株；4)對(duì)復(fù)篩得到的高產(chǎn)菌株進(jìn)行搖瓶發(fā)酵，結(jié)合氧化顯色法確認(rèn)酶活性。本發(fā)明方法適用于L?天冬氨酸β?脫羧酶產(chǎn)生菌的高通量篩選，篩選的菌株具有耐堿性能，在細(xì)胞生產(chǎn)過程中避免了繁瑣pH值控制步驟。同時(shí)也為同類生物酶產(chǎn)生菌的高通量篩選提供參考。