一種基于解旋酶和切刻酶的等溫擴增核酸檢測方法及試劑盒

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201810922821.9 申請日 -
公開（公告）號 CN109097448A 公開（公告）日 2018-12-28
申請公布號 CN109097448A 申請公布日 2018-12-28
分類號 C12Q1/6844 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳瑞;陳杰 申請（專利權）人 深圳百納心致生命科學有限公司
代理機構 廣州粵高專利商標代理有限公司 代理人 深圳市賽哲生物有限公司;廣州賽哲生物科技股份有限公司;深圳百納心致生命科學有限公司
地址 518067 廣東省深圳市南山區(qū)招商街道南海大道以西美年國際廣場1棟604-23
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于解旋酶和切刻酶的等溫擴增核酸檢測方法，包括如下步驟：S1.根據(jù)目標核酸序列設計特異性擴增引物和帶有切刻酶識別位點的Taqman探針；S2.將樣本核酸經(jīng)酶處理得到單鏈目標核酸模板；S3.將S1所得Taqman探針與S2所得單鏈目標核酸模板特異性結(jié)合，得到特異性結(jié)合產(chǎn)物，使用切刻酶酶切特異性結(jié)合產(chǎn)物，并實時檢測熒光信號。本發(fā)明將解旋酶與切刻酶聯(lián)合使用，設計帶有切刻酶切割位點的Taqman探針，無需擴增出大量核酸產(chǎn)物，只需要產(chǎn)生適量單鏈模板，然后用切刻酶不斷切割與靶位點結(jié)合的探針即可進行檢測，可以避免等溫擴增容易造成實驗室污染的缺點，操作簡便、快速，適用于現(xiàn)場快速檢測。