一種基于磁珠靶向富集目標(biāo)基因的核酸提取方法及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011134827.3 申請日 -
公開(公告)號 CN112226489A 公開(公告)日 2021-01-15
申請公布號 CN112226489A 申請公布日 2021-01-15
分類號 C12Q1/6806(2018.01)I;C12Q1/6844(2018.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳瑞;周敘全;章成;陳杰 申請(專利權(quán))人 深圳百納心致生命科學(xué)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京品源專利代理有限公司 代理人 深圳百納心致生命科學(xué)有限公司
地址 518118廣東省深圳市坪山區(qū)坑梓街道金輝路14號深圳市生物醫(yī)藥創(chuàng)新產(chǎn)業(yè)園區(qū)10號樓502號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種基于磁珠靶向富集目標(biāo)基因的核酸提取方法及其應(yīng)用,尤其是在重組酶等溫?cái)U(kuò)增中的應(yīng)用。所述核酸提取方法包括如下步驟:所述捕獲探針包括順次連接的啟動子和與目標(biāo)基因互補(bǔ)的核苷酸,并在所述捕獲探針的5′末端修飾氨基或羧基;通過氨基羧基縮合反應(yīng)將磁珠與所述捕獲探針相連,得到捕獲磁珠;將所述捕獲磁珠、樣本裂解液與待測樣本混合,加熱后洗滌,得到結(jié)合目標(biāo)基因的捕獲磁珠。所得捕獲磁珠可以加入等溫?cái)U(kuò)增或常規(guī)PCR擴(kuò)增反應(yīng)液進(jìn)行擴(kuò)增檢測。本發(fā)明中攜帶啟動子的捕獲探針顯著提高了檢測靈敏度,聯(lián)合重組酶等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),能夠解決高濃度背景核酸抑制等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)的問題,解決重組酶等溫?cái)U(kuò)增的實(shí)際應(yīng)用問題。??