基于高通量測序的PCR產(chǎn)物大樣本量混合建庫的文庫構(gòu)建方法和試劑

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710107944.2 申請日 -
公開（公告）號 CN108504651A 公開（公告）日 2018-09-07
申請公布號 CN108504651A 申請公布日 2018-09-07
分類號 C12N15/10;C40B50/06 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳建國;陳川;張靜;王瑢;楊傳春;張文勇 申請（專利權(quán)）人 深圳市樂土精準(zhǔn)醫(yī)療科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳鼎合誠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 孫銀行;彭家恩
地址 518000 廣東省深圳市南山區(qū)沙河西路深圳灣科技生態(tài)園一區(qū)2棟C座9層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于高通量測序的PCR產(chǎn)物大樣本量混合建庫的文庫構(gòu)建方法和試劑。方法包括：將來源于不同樣本DNA的多個PCR產(chǎn)物中的每一個，分別與帶有標(biāo)簽序列的隨機(jī)引物進(jìn)行退火，并在恒溫?cái)U(kuò)增酶的作用下進(jìn)行恒溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)；將不同樣本來源的恒溫?cái)U(kuò)增產(chǎn)物混合，并對混合產(chǎn)物進(jìn)行片段選擇；對片段選擇的產(chǎn)物進(jìn)行5’磷酸化平末端修復(fù)和3’末端加A反應(yīng)；與接頭序列連接，以得到能夠區(qū)分文庫信息的連接產(chǎn)物；對連接產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，以得到適用于高通量測序的上機(jī)文庫。本發(fā)明不依賴于超聲打斷儀器；實(shí)現(xiàn)混合建庫，降低建庫成本及復(fù)雜度；減少數(shù)據(jù)浪費(fèi)，提高測序數(shù)據(jù)的堿基隨機(jī)性、覆蓋深度均一性，從而降低單個樣本的測序成本。