適應(yīng)羊口瘡病毒增殖的永生化羊睪丸細胞系的構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201811179275.0 申請日 -
公開（公告）號 CN111019904A 公開（公告）日 2020-04-17
申請公布號 CN111019904A 申請公布日 2020-04-17
分類號 C12N5/10;C12N15/867 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 丁國杰;楊朋欣;馮育寧;周建華;薛曉娟;鄭玉芳;李媛妹;池賢鳳;侯丹丹 申請（專利權(quán)）人 安徽東方帝維生物制品股份有限公司
代理機構(gòu) 北京思元知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 余光軍;楊惠
地址 236800 安徽省亳州市經(jīng)濟開發(fā)區(qū)亳菊路889號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種適應(yīng)羊口瘡病毒(ORFV)增殖的永生化羊睪丸細胞系的構(gòu)建方法，包括將SV40大T抗原通過慢病毒載體導(dǎo)入原代羊睪丸細胞，通過細胞克隆技術(shù)，篩選和純化可持續(xù)傳代的細胞，最終篩選出一株傳代和生長性能良好的永生化細胞株。病毒感染和復(fù)制動力學(xué)試驗表明，本發(fā)明所構(gòu)建的永生化細胞系為ORFV適應(yīng)細胞系，命名為羊睪丸細胞DST?3，F(xiàn)10代細胞DST?3接種ORFV AH?GY13株，毒價達10?6.4TCID50/ml，與在原代細胞中的復(fù)制水平相似。本發(fā)明為ORFV弱毒疫苗和滅活疫苗的研制與生產(chǎn)提供了穩(wěn)定的細胞環(huán)境和標準化的培養(yǎng)方法。