基因敲除方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710672040.4 申請日 -
公開（公告）號(hào) CN109385421A 公開（公告）日 2019-02-26
申請公布號(hào) CN109385421A 申請公布日 2019-02-26
分類號(hào) C12N15/113（2010.01）I; C12N15/90（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 魏文勝; 陳一歐; 周悅欣; 張鴻敏; 袁鵬飛; 劉源 申請（專利權(quán)）人 博雅緝因（北京）生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京知元同創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 北京大學(xué); 博雅緝因（北京）生物科技有限公司
地址 100871 北京市海淀區(qū)頤和園路5號(hào)北京大學(xué)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及通用供體構(gòu)建體，以及基因敲除方法及其系統(tǒng)和試劑盒。本發(fā)明的基因敲除方法通過非同源末端連接將通用供體構(gòu)建體中包含的標(biāo)記物基因插入到細(xì)胞基因組中的雙鏈斷裂位置上，通過表達(dá)的標(biāo)記物富集基因被敲除的細(xì)胞，提高了通過序列特異性核酸酶產(chǎn)生基因敲除的效率。本發(fā)明的通用供體構(gòu)建體包含通用線性供體DNA，所述通用線性供體DNA上包含可以被序列特異性核酸酶切割的通用靶序列，該通用靶序列在待進(jìn)行基因敲除的細(xì)胞的基因組中不存在，因此，在進(jìn)行基因敲除時(shí)，無需專門構(gòu)建配套使用的線性供體DNA，直接使用通用線性供體DNA和靶向該通用線性供體DNA的gRNA即可。