一種高效構(gòu)建sgRNAs質(zhì)粒文庫的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111338971.3 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN113981547A 公開（公告）日 2022-01-28
申請(qǐng)公布號(hào) CN113981547A 申請(qǐng)公布日 2022-01-28
分類號(hào) C40B50/06（2006.01）I;C40B40/06（2006.01）I;C12N15/113（2010.01）I 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 金鳴;袁鵬飛 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 博雅緝因（北京）生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京彩和律師事務(wù)所 代理人 張紅春
地址 102206北京市昌平區(qū)科學(xué)園路22號(hào)2棟2層
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種高效構(gòu)建sgRNAs質(zhì)粒文庫的方法和用該方法制備的sgRNAs質(zhì)粒文庫。所述方法包括：1）合成和擴(kuò)增sgRNA序列；2）將sgRNA序列通過酶切連接，插入質(zhì)粒載體；3）將步驟2）獲得的包含sgRNA序列的質(zhì)粒載體通過電擊轉(zhuǎn)化感受態(tài)細(xì)胞；和4）擴(kuò)增培養(yǎng)。本發(fā)明對(duì)電擊轉(zhuǎn)化建庫過程中涉及的關(guān)鍵參數(shù)進(jìn)行交叉組合，通過評(píng)估電擊轉(zhuǎn)化效率以及文庫質(zhì)量等，顯著降低文庫構(gòu)建時(shí)的工作量，為sgRNA質(zhì)粒文庫構(gòu)建提供了穩(wěn)定高效的方法。