雙sgRNA文庫(kù)的構(gòu)建及其應(yīng)用于高通量功能性篩選研究的方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN201610969127.3 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN106637421B | 公開（公告）日 | 2019-12-27 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN106637421B | 申請(qǐng)公布日 | 2019-12-27 |
| 分類號(hào) | C40B50/06;C12N15/867;C12Q1/6869 | 分類 | 組合技術(shù)〔8〕; |
| 發(fā)明人 | 魏文勝;朱詩(shī)優(yōu) | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 博雅緝因（北京）生物科技有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 北京知元同創(chuàng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) | 代理人 | 劉元霞;牛艷玲 |
| 地址 | 102206 北京市昌平區(qū)中關(guān)村生命科學(xué)園科學(xué)園路22號(hào)2幢2層201-203室 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明提供構(gòu)建pgRNA表達(dá)質(zhì)粒文庫(kù)的方法，所述pgRNA表達(dá)質(zhì)粒文庫(kù)當(dāng)與Cas蛋白一同被引入細(xì)胞中時(shí)，可以使得基因組上兩個(gè)sgRNA靶位點(diǎn)被切割，引起靶核酸序列的敲除，通過(guò)靶核酸序列的敲除篩選功能性的核酸序列。本發(fā)明還提供構(gòu)建核酸序列敲除文庫(kù)的方法，所述核酸序列敲除文庫(kù)通過(guò)將本發(fā)明的pgRNA文庫(kù)轉(zhuǎn)入細(xì)胞獲得，所述基因敲除文庫(kù)可用于篩選功能性核酸序列。本發(fā)明還提供高通量篩選功能性核酸序列的方法。本發(fā)明是一種高通量CRISPR/Cas策略，可以使用多對(duì)gRNA(pgRNA)產(chǎn)生大量核酸序列的刪除，使得能夠快速鑒別功能性核酸序列。 |
