雙sgRNA文庫的構(gòu)建及其應用于高通量功能性篩選研究的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201610969127.3 申請日 -
公開（公告）號 CN106637421B 公開（公告）日 2019-12-27
申請公布號 CN106637421B 申請公布日 2019-12-27
分類號 C40B50/06;C12N15/867;C12Q1/6869 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 魏文勝;朱詩優(yōu) 申請（專利權(quán)）人 博雅緝因（北京）生物科技有限公司
代理機構(gòu) 北京知元同創(chuàng)知識產(chǎn)權(quán)代理事務所(普通合伙) 代理人 劉元霞;牛艷玲
地址 102206 北京市昌平區(qū)中關(guān)村生命科學園科學園路22號2幢2層201-203室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供構(gòu)建pgRNA表達質(zhì)粒文庫的方法，所述pgRNA表達質(zhì)粒文庫當與Cas蛋白一同被引入細胞中時，可以使得基因組上兩個sgRNA靶位點被切割，引起靶核酸序列的敲除，通過靶核酸序列的敲除篩選功能性的核酸序列。本發(fā)明還提供構(gòu)建核酸序列敲除文庫的方法，所述核酸序列敲除文庫通過將本發(fā)明的pgRNA文庫轉(zhuǎn)入細胞獲得，所述基因敲除文庫可用于篩選功能性核酸序列。本發(fā)明還提供高通量篩選功能性核酸序列的方法。本發(fā)明是一種高通量CRISPR/Cas策略，可以使用多對gRNA(pgRNA)產(chǎn)生大量核酸序列的刪除，使得能夠快速鑒別功能性核酸序列。