一種可誘導(dǎo)性拯救彈狀病毒的細(xì)胞系及其構(gòu)建方法與應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710882796.1 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN107557340A 公開（公告）日 2018-01-09
申請(qǐng)公布號(hào) CN107557340A 申請(qǐng)公布日 2018-01-09
分類號(hào) C12N5/10(2006.01)I;C12N15/867(2006.01)I;C12N15/90(2006.01)I;C12N15/85(2006.01)I;C12N7/00(2006.01)I;C12R1/93(2006.01)N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王紅偉;樓建華;徐章敏 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 南京普菲科醫(yī)藥科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 南京經(jīng)緯專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 南京普菲科醫(yī)藥科技有限公司
地址 210000 江蘇省南京市鼓樓區(qū)虎踞北路41號(hào)02-1室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種可誘導(dǎo)性拯救彈狀病毒的細(xì)胞系及其構(gòu)建方法與應(yīng)用。所述細(xì)胞系為慢病毒誘導(dǎo)表達(dá)T7pol/P/N的BHK(TetOn)細(xì)胞系，所述的彈狀病毒構(gòu)建方法是將病毒聚合酶基因質(zhì)粒pL及彈狀病毒核心骨架質(zhì)粒pCore雙質(zhì)粒按照特定的比例轉(zhuǎn)染BHK(T7pol/P/N?TetOn)細(xì)胞系快速獲得重組彈狀病毒。誘導(dǎo)表達(dá)T7pol/P/N的載體通過(guò)pGag/Pol，pRSV?Rev和pMD2.G慢病毒質(zhì)粒系統(tǒng)整合于BHK(TetOn)細(xì)胞基因組。本發(fā)明能高效的對(duì)彈狀病毒組裝進(jìn)行快速拯救并完成篩選鑒定，與傳統(tǒng)的多質(zhì)粒拯救系統(tǒng)相比大大的提高重組彈狀病毒的拯救效率。