一種從人脂肪組織中分離培養(yǎng)內(nèi)皮克隆形成細(xì)胞的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201510698296.3 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN105154391B 公開（公告）日 2019-04-26
申請(qǐng)公布號(hào) CN105154391B 申請(qǐng)公布日 2019-04-26
分類號(hào) C12N5/074（2010.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 范兆心; 陳強(qiáng); 賴真陽(yáng) 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 四川新生命干細(xì)胞科技股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 成都高遠(yuǎn)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 四川新生命干細(xì)胞科技股份有限公司
地址 610000 四川省成都市金牛區(qū)金泉路15號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種從人脂肪組織中分離培養(yǎng)內(nèi)皮克隆形成細(xì)胞的方法，它包括如下步驟：a、取脂肪組織，洗滌，消化，離心，得細(xì)胞沉淀；b、清洗步驟a的細(xì)胞沉淀，置于含10％FBS的細(xì)胞培養(yǎng)基中，培養(yǎng)48小時(shí)；c、將步驟b中含10％FBS的細(xì)胞培養(yǎng)基更換為EGM2培養(yǎng)基，培養(yǎng)至鋪路石樣細(xì)胞克隆團(tuán)出現(xiàn)，培養(yǎng)期間每2?3天換液；d、將EGM2培養(yǎng)基更換為混合培養(yǎng)基，每2天換液，直至細(xì)胞匯合度達(dá)到80?90％，即可。本發(fā)明還提供了制備得到的內(nèi)皮克隆形成細(xì)胞。應(yīng)用本發(fā)明提供的分離方法，可以從脂肪組織中高效的獲得內(nèi)皮克隆形成細(xì)胞；而且本發(fā)明方法操作簡(jiǎn)單、分離培養(yǎng)時(shí)間短，具有良好的應(yīng)用前景。