一種基于固相法分離N-糖肽和O-糖肽的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202011481041.9 申請日 -
公開(公告)號 CN112578061A 公開(公告)日 2021-03-30
申請公布號 CN112578061A 申請公布日 2021-03-30
分類號 G01N30/08(2006.01)I;G01N30/88(2006.01)I 分類 測量;測試;
發(fā)明人 楊霜;李舒?zhèn)?/td> 申請(專利權(quán))人 南京譜利健生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海浙晟知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 楊小雙
地址 211500江蘇省南京市棲霞區(qū)仙林街道仙林大學(xué)城緯地路9號D6棟1002室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基于固相法分離N?糖肽和O?糖肽的方法,首先通過還原胺化反應(yīng)將糖蛋白偶聯(lián)到固相樹脂上,然后對糖蛋白唾液酸進(jìn)行衍生化并清洗,再加入蛋白消化酶對固定在樹脂上的糖蛋白進(jìn)行降解處理。產(chǎn)生的糖肽用親水色譜柱富集。然后通過表面修飾凝集素的固相柱,將O?糖肽保留在凝集素固相柱上,而N?糖肽包含在過濾液中。采用O?糖肽切割酶(OpeRATOR),將結(jié)合在凝集素上的O?糖肽切割洗脫;或采用多肽變性方法將O?糖肽洗脫。這樣就將N?糖肽和O?糖肽分別進(jìn)行了富集分離,本方法對研究各種病毒的致病機(jī)制,包括新型冠狀病毒COVID?19,禽流感、寨卡病毒(Zika virus)和登革病毒(Denge virus),開發(fā)疫苗等方面有著重要意義。??