一種檢測蛋白磷酸化和乙酰氨基葡萄糖化關(guān)聯(lián)作用的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910893435.6 申請日 -
公開(公告)號 CN110609078A 公開(公告)日 2019-12-24
申請公布號 CN110609078A 申請公布日 2019-12-24
分類號 G01N27/62;G01N1/28;G01N1/34;G01N1/40;C07D495/04 分類 測量;測試;
發(fā)明人 李舒?zhèn)?丁慧娜 申請(專利權(quán))人 南京譜利健生物技術(shù)有限公司
代理機構(gòu) 南京眾聯(lián)專利代理有限公司 代理人 南京譜利健生物技術(shù)有限公司
地址 210033 江蘇省南京市棲霞區(qū)仙林大學(xué)城緯地路9號F7棟305室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種檢測蛋白磷酸化和乙酰氨基葡萄糖化關(guān)聯(lián)作用的方法,所述方法包括以下步驟:將胰蛋白酶處理得到的多肽樣品平均分配成三等分,第一個等分用磷酸酶處理,用IBT?10Plex116C標(biāo)記;第二個等分用O?乙酰葡萄糖胺水解酶處理,用IBT?10Plex117N標(biāo)記;第三等分無特殊處理,用IBT?10Plex118N標(biāo)記;樣品混合,與氫氧化鋇、一個含有生物素和巰基的雙官能團(tuán)化合物反應(yīng),通過鏈霉親和素蛋白?磁珠從混合物中被親和富集;用紫外光光照除去含巰基化合物的其他結(jié)構(gòu),得到多肽衍生物用于質(zhì)譜分析。本發(fā)明可以找出整個蛋白質(zhì)組中同時具有磷酸化和O?GlcNAcylation的Ser/Thr位點,為有氧糖酵解和信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通道之間的關(guān)系提供了具體數(shù)據(jù),促進(jìn)癌細(xì)胞特定生物標(biāo)志物的發(fā)現(xiàn),用于腫瘤的早期診斷以及治療藥物新靶點。