一種基于高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)目的微生物基因組RNA的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010809329.8 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN114075596A 公開（公告）日 2022-02-22
申請(qǐng)公布號(hào) CN114075596A 申請(qǐng)公布日 2022-02-22
分類號(hào) C12Q1/6869（2018.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 馬珍子;林永權(quán);吳紅龍 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 深圳華大基因股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳鼎合誠(chéng)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 張海平;彭家恩
地址 518057廣東省深圳市南山區(qū)粵海街道高新區(qū)社區(qū)高新南四道025號(hào)高新工業(yè)村W2A棟、B棟A棟201203A5
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于高通量測(cè)序和微生物檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種基于高通量測(cè)序技術(shù)檢測(cè)目的微生物基因組RNA的方法。本發(fā)明方法包括對(duì)包含目的微生物的待測(cè)樣本進(jìn)行核酸提取、DNA消化、RNA純化、RNA片段化、反轉(zhuǎn)錄合成cDNA分子、cDNA文庫(kù)構(gòu)建、高通量測(cè)序和測(cè)序數(shù)據(jù)分析，檢測(cè)出樣本中目的微生物基因組RNA的狀況。在DNA消化步驟中，采用DNA酶在37℃至42℃下孵育10至30分鐘的溫和條件下進(jìn)行消化，并且進(jìn)一步地，在RNA片段化步驟中采用熱打斷手段。本發(fā)明方法由于采用了溫和的消化手段和熱打斷手段，可以高效、快速、低成本地富集微生物基因組RNA，提高微生物基因組RNA的含量，提高RNA高通量測(cè)序文庫(kù)構(gòu)建的成功率，從而提高微生物基因組RNA的檢測(cè)靈敏度。