一種構(gòu)建DNA片段敲除文庫(kù)的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202011219314.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN113462681A 公開(kāi)（公告）日 2021-10-01
申請(qǐng)公布號(hào) CN113462681A 申請(qǐng)公布日 2021-10-01
分類號(hào) C12N15/10（2006.01）I;C12N15/867（2006.01）I;C12N15/65（2006.01）I;C40B50/06（2006.01）I;C40B40/02（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 蔣棟;王江華;謝興旺;王雪艷;畢晶磊;史云強(qiáng) 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 北京可瑞生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京路浩知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 商秀玲
地址 102200北京市昌平區(qū)沙河鎮(zhèn)能源東路1號(hào)院1號(hào)樓3層317-2
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種構(gòu)建DNA片段敲除文庫(kù)的方法，具體涉及基于Cpf1系統(tǒng)構(gòu)建擬敲除片段上下游sgRNA序列的陣列，形成sgRNA敲除文庫(kù)。在本發(fā)明所述方法中，擬敲除片段上下游的同側(cè)sgRNA間隔在30?100bp；擬敲除片段上下游的兩側(cè)sgRNA間隔小于10kb，以此sgRNA設(shè)置標(biāo)準(zhǔn)設(shè)計(jì)得到的sgRNA陣列，對(duì)DNA片段刪除效率更高更準(zhǔn)確。本發(fā)明所述的擬敲除片段可以是編碼基因、非編碼RNA、miRNA、甲基化島、啟動(dòng)子或增強(qiáng)子中的一種或多種。