一種乳液中進(jìn)行環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增的突變核酸數(shù)字分析方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710838661.5 申請日 -
公開（公告）號(hào) CN107447031B 公開（公告）日 2020-07-03
申請公布號(hào) CN107447031B 申請公布日 2020-07-03
分類號(hào) C12Q1/6844 分類 -
發(fā)明人 蔣健暉;唐麗娟;陳基耘;鐘志堅(jiān) 申請（專利權(quán)）人 湖南融健生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京泛華偉業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 湖南融健基因生物科技有限公司
地址 410021 湖南省長沙市雨花區(qū)雨花路88號(hào)裕華名苑4棟2219、2220室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種乳液中進(jìn)行環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增的突變核酸數(shù)字分析方法，將生物素標(biāo)記的環(huán)引物與親和素標(biāo)記的磁珠結(jié)合后，與環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增的內(nèi)引物、另一熒光標(biāo)記的內(nèi)引物、環(huán)引物及緩沖溶液、目標(biāo)核酸、酶等反應(yīng)試劑混合均勻，與油相在機(jī)械作用力下混合均勻，形成穩(wěn)定的乳液，在適宜的反應(yīng)溫度下，乳液中存在目標(biāo)突變核酸的液滴發(fā)生環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)，得到磁性顆粒?LAMP產(chǎn)物?熒光標(biāo)記內(nèi)引物的復(fù)合物，破乳后收集反應(yīng)得到的磁珠，通過顯微鏡和流式細(xì)胞儀實(shí)現(xiàn)突變核酸的數(shù)字分析。本發(fā)明所述的突變核酸數(shù)字分析方法利用環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增的優(yōu)勢縮短了時(shí)間、提高了效率，實(shí)現(xiàn)了突變核酸的定量分析。