高效制備口蹄疫病毒樣顆粒的重組DNA載體、應(yīng)用和疫苗

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201910476738.8 申請日 -
公開(公告)號 CN110129348A 公開(公告)日 2019-08-16
申請公布號 CN110129348A 申請公布日 2019-08-16
分類號 C12N15/63;C12N15/42;C07K14/09;A61K39/135;A61P31/14;G01N33/569 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 許雁;諾曼.吉利卡;李改;夏燕 申請(專利權(quán))人 諾華生物科技(武漢)有限責(zé)任公司
代理機構(gòu) 上海精晟知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 諾華生物科技(武漢)有限責(zé)任公司;許雁
地址 430073 湖北省武漢市東湖開發(fā)區(qū)高新大道666號B1棟203室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種用于高效制備口蹄疫病毒樣顆粒的重組DNA載體,以及利用包含該重組DNA載體的重組表達質(zhì)粒載體轉(zhuǎn)染宿主細(xì)胞制備的口蹄疫病毒樣顆粒、其應(yīng)用及疫苗。針對3C蛋白酶對宿主細(xì)胞的毒性及影響口蹄疫VLP的產(chǎn)量問題,本發(fā)明設(shè)計了針對3C蛋白酶基因表達起干擾作用的3CshRNA片段,明顯減少了口蹄疫VLP制備過程中3C蛋白酶的表達量,同時在原始口蹄疫病毒3C蛋白酶基因的基礎(chǔ)上進行三個位點的突變,特異性調(diào)節(jié)了3C蛋白酶的作用效果。通過對3C蛋白酶基因的改造,降低了3C蛋白酶對宿主細(xì)胞的毒性并提高了3C蛋白酶對口蹄疫病毒P1前體蛋白的有效切割性能,從而顯著提高了口蹄疫病毒樣顆粒的合成產(chǎn)量,為大規(guī)模生產(chǎn)和使用口蹄疫病毒樣顆粒疫苗奠定了基礎(chǔ)。