一種用短串聯(lián)重復(fù)序列位點(diǎn)等位基因階梯的個(gè)體識(shí)別DNA鑒定方法及其檢測(cè)試劑盒

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN200410025157.6 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN1644709A 公開（公告）日 2005-07-27
申請(qǐng)公布號(hào) CN1644709A 申請(qǐng)公布日 2005-07-27
分類號(hào) C12Q1/68 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 陳光輝;李莉;王亞新 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 上海申友健海生物技術(shù)有限責(zé)任公司
代理機(jī)構(gòu) 上海浦東良風(fēng)專利代理有限責(zé)任公司 代理人 上海申友健海生物技術(shù)有限責(zé)任公司;司法部司法鑒定科學(xué)技術(shù)研究所
地址 201203上海市浦東新區(qū)張江高科技園區(qū)法拉第路17號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種用短串聯(lián)重復(fù)序列位點(diǎn)等位基因階梯的個(gè)體識(shí)別DNA鑒定方法及其檢測(cè)試劑盒，其特征是采用三色熒光標(biāo)記STR位點(diǎn)等位基因階梯的制備技術(shù)，步驟如下：篩選用于個(gè)體識(shí)別DNA檢測(cè)的STR位點(diǎn)；設(shè)計(jì)合成特異PCR擴(kuò)增普通引物和分組熒光標(biāo)記引物；收集人體組織樣本；提取人基因組DNA；進(jìn)行PCR反應(yīng)；電泳檢測(cè)擴(kuò)增片段，割膠純化；將PCR產(chǎn)物連接到載體上，得到各不同等位基因的克隆；用對(duì)應(yīng)的熒光標(biāo)記引物對(duì)每個(gè)等位基因進(jìn)行PCR，制備不同的各等位基因；根據(jù)擴(kuò)增產(chǎn)物的熒光值檢測(cè)定量各等位基因；混合各STR位點(diǎn)的各等位基因的PCR擴(kuò)增產(chǎn)物，加入試劑穩(wěn)定劑，即可得到等位基因階梯，該等位基因階梯用于個(gè)體識(shí)別DNA熒光檢測(cè)試劑盒，達(dá)到基因分型識(shí)別的功能。本發(fā)明無需反復(fù)收集具有不同基因型個(gè)體的血標(biāo)本，具有制作簡(jiǎn)便、成本低、穩(wěn)定性好。