用于外源基因定點(diǎn)插入的基因編輯系統(tǒng)和方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202010875673.7 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN114107292A 公開(kāi)（公告）日 2022-03-01
申請(qǐng)公布號(hào) CN114107292A 申請(qǐng)公布日 2022-03-01
分類號(hào) C12N15/113（2010.01）I;C12N9/22（2006.01）I;C12N15/90（2006.01）I;C12N5/10（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 栗鳳鵬;曹青;李華順 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 阿思科力（蘇州）生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 蘇州三英知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 朱如松
地址 215000江蘇省蘇州市工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)A2樓427單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明實(shí)施例公開(kāi)了一種用于外源基因定點(diǎn)插入的基因編輯系統(tǒng)和方法，所述基因編輯系統(tǒng)，包括Cas9、sgRNA和ssDNA，所述Cas9和sgRNA構(gòu)成RNP復(fù)合物，所述sgRNA為外源基因的插入位點(diǎn)，所述ssDNA為外源基因的插入模板。本發(fā)明主要利用基因編輯技術(shù)，通過(guò)ssDNA利用作為外源基因的插入模板，在sgRNA的配合下，成功在AAVS1位點(diǎn)實(shí)現(xiàn)4.5kb（aAPC1：EF1a?CD19?CD86?CD64?PolyA）的定點(diǎn)敲入；AAVS1敲入外源基因片段具有穩(wěn)定表達(dá)、不影響其他基因轉(zhuǎn)錄的優(yōu)點(diǎn)；從而使改造后的細(xì)胞遺傳背景更為簡(jiǎn)單和統(tǒng)一，排除插入位點(diǎn)和拷貝數(shù)對(duì)其它基因功能的影響。