一種用于檢測(cè)植物番茄斑萎病毒的crDNA、crRNA、試劑盒和方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111231803.4 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN114058737A 公開(公告)日 2022-02-18
申請(qǐng)公布號(hào) CN114058737A 申請(qǐng)公布日 2022-02-18
分類號(hào) C12Q1/70(2006.01)I;C12Q1/6844(2018.01)I;C12Q1/6804(2018.01)I;C12N15/113(2010.01)I;C12N15/11(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 楊金廣;張萬紅;藺忠龍;焦玉冰;李瑩;申莉莉;王鳳龍;劉春明;夏振遠(yuǎn) 申請(qǐng)(專利權(quán))人 云南省煙草公司紅河州公司
代理機(jī)構(gòu) 武漢聚信匯智知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 馬尚偉
地址 266101山東省青島市嶗山區(qū)科苑經(jīng)四路11號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種用于檢測(cè)植物番茄斑萎病毒的crDNA、crRNA、試劑盒和方法,所述crDNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;所述crRNA的核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示;所述試劑盒含有所述crDNA或者所述的crRNA、以及Cas13a蛋白和熒光探針。所述方法包括:提取待測(cè)的植物樣品總RNA,后通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA;以所述cDNA為模板擴(kuò)增獲得DNA擴(kuò)增產(chǎn)物;將所述的擴(kuò)增產(chǎn)物、crRNA、Cas13a蛋白和熒光探針和無酶水構(gòu)成的檢測(cè)反應(yīng)體系進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明具有成本低、可多次重復(fù)檢測(cè)、方法簡(jiǎn)單、檢測(cè)速度快、靈敏(最低檢測(cè)極限達(dá)到10拷貝/uL)、特異形的特點(diǎn)。