一種基于人工修飾引物的定量突變檢測系統(tǒng)

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201410044150.2 申請日 -
公開(公告)號 CN103789436B 公開(公告)日 2015-09-30
申請公布號 CN103789436B 申請公布日 2015-09-30
分類號 C12Q1/68(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 不公告發(fā)明人 申請(專利權(quán))人 廣西識遠(yuǎn)醫(yī)學(xué)檢驗實驗室有限公司
代理機構(gòu) - 代理人 -
地址 100070 北京市豐臺區(qū)豐臺科學(xué)城航豐路8號1幢樓1808室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于生物技術(shù)領(lǐng)域。更具體而言,本發(fā)明涉及基因突變的檢測。本發(fā)明提供了一種基于人工修飾引物的定量突變檢測系統(tǒng)。本發(fā)明的定量突變檢測系統(tǒng)主要包括引物設(shè)計、PCR反應(yīng)和產(chǎn)物檢測三個步驟。通過在引物3’端5個堿基的區(qū)域內(nèi)引入一個或者一個以上的人工突變,并基于調(diào)節(jié)3’端引物與模板結(jié)合的熱力學(xué)性質(zhì)來確保DNA聚合酶結(jié)合時具有一定的穩(wěn)定性,但又不至于太高,從而降低了假陽性,顯著提高了選擇性;通過在引物5’端加熒光以及聯(lián)用熒光毛細(xì)管電泳來檢測PCR產(chǎn)物,進一步提高了選擇性,并可實現(xiàn)對樣品突變的半定量分析。