一種高活性凝血因子IX突變體、重組蛋白與融合蛋白的制備與應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201610898732.6 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN106497949A 公開(kāi)（公告）日 2017-03-15
申請(qǐng)公布號(hào) CN106497949A 申請(qǐng)公布日 2017-03-15
分類號(hào) C12N15/57(2006.01)I;C12N9/64(2006.01)I;C12N15/864(2006.01)I;A61K38/48(2006.01)I;A61K48/00(2006.01)I;A61P7/04(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王學(xué)鋒;武文漫;丁秋蘭;董飚 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 四川至善唯新生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海泰能知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所 代理人 上海交通大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬瑞金醫(yī)院;四川大學(xué)
地址 200025 上海市黃浦區(qū)瑞金二路197號(hào)（永嘉路口）
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種高活性凝血因子IX突變體、重組蛋白與融合蛋白的制備與應(yīng)用，突變體核苷酸序列如SEQ?ID?NO:1所示。制備方法包括如下步驟：(1)將凝血因子IX基因連入載體中，得到重組載體；(2)將上述重組載體轉(zhuǎn)化宿主細(xì)胞，得到表達(dá)突變凝血因子IX蛋白細(xì)胞克隆；(3)于無(wú)血清培養(yǎng)基中連續(xù)灌流培養(yǎng)上述細(xì)胞克隆，誘導(dǎo)重組高活性凝血因子IX突變蛋白的表達(dá)；(4)分離純化、過(guò)濾，最后灌裝、凍干，即得。本發(fā)明證實(shí)了IX突變Arg384Gln確實(shí)導(dǎo)致凝血因子IX活性升高，而且沒(méi)有導(dǎo)致除凝血機(jī)制異常之外的其他危害，對(duì)人體是安全的，打破了現(xiàn)有研究的技術(shù)偏見(jiàn)，具有很好的基因治療和替代治療前景。