通用型CAR-T細(xì)胞、其制備方法及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911407988.2 申請日 -
公開（公告）號(hào) CN110951695A 公開（公告）日 2020-04-03
申請公布號(hào) CN110951695A 申請公布日 2020-04-03
分類號(hào) C12N5/10(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姜舒;張蕓;熊斌;王冰;紀(jì)惜鑾 申請（專利權(quán)）人 深圳市茵冠生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 深圳市博銳專利事務(wù)所 代理人 深圳市茵冠生物科技有限公司
地址 518000廣東省深圳市南山區(qū)西麗鎮(zhèn)茶光路1089號(hào)深圳集成電路設(shè)計(jì)應(yīng)用產(chǎn)業(yè)園304
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種通用型CAR?T細(xì)胞、其制備方法及其應(yīng)用，該通用型CAR?T細(xì)胞的制備方法，包括以下步驟：(1)利用擴(kuò)增引物P1?P5分別對(duì)pCDH、3gRNA、EF1α、GPC3 CAR?1和GPC3 CAR?2片段進(jìn)行PCR擴(kuò)增，然后將獲得的擴(kuò)增片段依次進(jìn)行連接；采用引物P6對(duì)連接產(chǎn)物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，將擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳鑒定，鑒定正確后轉(zhuǎn)化至感受態(tài)細(xì)胞；構(gòu)建獲得pLenti?3gRNA?EF1α?GPC3 CAR重組慢病毒質(zhì)粒，包裝病毒顆粒；(2)感染擴(kuò)增后的T淋巴細(xì)胞，通過電轉(zhuǎn)化導(dǎo)入Cas9 mRNA，獲得所述通用型CAR?T細(xì)胞。本發(fā)明具有免疫排斥反應(yīng)低、腫瘤細(xì)胞殺傷效率高的優(yōu)點(diǎn)。??