一種人牙髓干細(xì)胞的分離和擴(kuò)增方法及其應(yīng)用
基本信息
申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010824170.7 | 申請(qǐng)日 | - |
公開(公告)號(hào) | CN111909898B | 公開(公告)日 | 2021-03-23 |
申請(qǐng)公布號(hào) | CN111909898B | 申請(qǐng)公布日 | 2021-03-23 |
分類號(hào) | C12N5/0775(2010.01)I;A61L27/38(2006.01)I | 分類 | 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程; |
發(fā)明人 | 姜舒;張蕓;紀(jì)惜鑾;謝亮 | 申請(qǐng)(專利權(quán))人 | 深圳市茵冠生物科技有限公司 |
代理機(jī)構(gòu) | 廣州科沃園專利代理有限公司 | 代理人 | 張帥 |
地址 | 518000廣東省深圳市南山區(qū)西麗鎮(zhèn)茶光路1089號(hào)深圳集成電路設(shè)計(jì)應(yīng)用產(chǎn)業(yè)園304 | ||
法律狀態(tài) | - |
摘要
摘要 | 本發(fā)明涉及醫(yī)藥生物領(lǐng)域,提供了一種人牙髓干細(xì)胞的分離和擴(kuò)增方法及其應(yīng)用,其中分離和擴(kuò)增方法包括以下步驟:S1.取人牙髓組織,剪碎后添加膠原酶I、透明質(zhì)酸酶和分散酶II進(jìn)行消化,獲得消化的組織、細(xì)胞懸液;S2.采用濾網(wǎng)對(duì)消化的組織、細(xì)胞懸液進(jìn)行過濾,將過濾液離心后取細(xì)胞沉淀,獲得人牙髓干細(xì)胞;S3.將人牙髓干細(xì)胞接種于培養(yǎng)皿中,培養(yǎng)皿預(yù)先包被人纖維連接蛋白,加入培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),匯合率達(dá)到70~80%時(shí),進(jìn)行傳代培養(yǎng)。本發(fā)明方法細(xì)胞貼壁時(shí)間短,培養(yǎng)至第10天細(xì)胞數(shù)量至少達(dá)4.5×105,細(xì)胞純度高,牙髓干細(xì)胞表面標(biāo)志CD73、CD90、CD105陽(yáng)性表達(dá)率99%以上,陰性指標(biāo)表達(dá)率低于1.2%。?? |
