一種人牙髓干細(xì)胞的分離和擴(kuò)增方法及其應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010824170.7 申請日 -
公開（公告）號 CN111909898A 公開（公告）日 2020-11-10
申請公布號 CN111909898A 申請公布日 2020-11-10
分類號 C12N5/0775(2010.01)I;A61L27/38(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姜舒;張蕓;紀(jì)惜鑾;謝亮 申請（專利權(quán)）人 深圳市茵冠生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州科沃園專利代理有限公司 代理人 深圳市茵冠生物科技有限公司
地址 518000廣東省深圳市南山區(qū)西麗鎮(zhèn)茶光路1089號深圳集成電路設(shè)計(jì)應(yīng)用產(chǎn)業(yè)園304
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及醫(yī)藥生物領(lǐng)域，提供了一種人牙髓干細(xì)胞的分離和擴(kuò)增方法及其應(yīng)用，其中分離和擴(kuò)增方法包括以下步驟：S1.取人牙髓組織，剪碎后添加膠原酶I、透明質(zhì)酸酶和分散酶II進(jìn)行消化，獲得消化的組織、細(xì)胞懸液；S2.采用濾網(wǎng)對消化的組織、細(xì)胞懸液進(jìn)行過濾，將過濾液離心后取細(xì)胞沉淀，獲得人牙髓干細(xì)胞；S3.將人牙髓干細(xì)胞接種于培養(yǎng)皿中，培養(yǎng)皿預(yù)先包被人纖維連接蛋白，加入培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)，匯合率達(dá)到70～80％時，進(jìn)行傳代培養(yǎng)。本發(fā)明方法細(xì)胞貼壁時間短，培養(yǎng)至第10天細(xì)胞數(shù)量至少達(dá)4.5×105，細(xì)胞純度高，牙髓干細(xì)胞表面標(biāo)志CD73、CD90、CD105陽性表達(dá)率99％以上，陰性指標(biāo)表達(dá)率低于1.2％。??