一種人母乳干細(xì)胞的制備方法及其應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710092955.8 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN106701663B 公開(kāi)（公告）日 2019-12-27
申請(qǐng)公布號(hào) CN106701663B 申請(qǐng)公布日 2019-12-27
分類號(hào) C12N5/074;A61L27/38 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姜舒;張蕓;紀(jì)惜鑾;楊順;羅朝霞 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 深圳市茵冠生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州瑞之凡知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 深圳市茵冠生物科技有限公司
地址 518055 廣東省深圳市南山區(qū)茶光路1089號(hào)深圳集成電路設(shè)計(jì)應(yīng)用產(chǎn)業(yè)園304
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種人母乳干細(xì)胞的制備方法及其應(yīng)用，其中的制備方法包括以下步驟：采集母乳；分離人母乳細(xì)胞，得到純化后的母乳細(xì)胞懸液；將純化后的母乳細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到包被體積百分比為0.01?0.05%的明膠的培養(yǎng)板中，置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天換液1次，第6天分離單個(gè)細(xì)胞克隆并接種到新的超低粘附培養(yǎng)板中，促進(jìn)克隆形成；當(dāng)細(xì)胞融合至80%以上時(shí)，添加胰蛋白酶，37℃消化5min，終止消化，收集細(xì)胞沉淀，洗滌離心后，用新鮮的細(xì)胞培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，按1:3傳代。采用本發(fā)明的技術(shù)方案，操作簡(jiǎn)便，無(wú)需采用飼養(yǎng)層細(xì)胞共培養(yǎng)，而且可以更好的維持人母乳干細(xì)胞未分化狀態(tài)，且獲得的人母乳干細(xì)胞數(shù)量更多。