一種人母乳干細胞的制備方法及其應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710092955.8 申請日 -
公開（公告）號 CN106701663B 公開（公告）日 2019-12-27
申請公布號 CN106701663B 申請公布日 2019-12-27
分類號 C12N5/074;A61L27/38 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 姜舒;張蕓;紀惜鑾;楊順;羅朝霞 申請（專利權）人 深圳市茵冠生物科技有限公司
代理機構 廣州瑞之凡知識產權代理事務所(普通合伙) 代理人 深圳市茵冠生物科技有限公司
地址 518055 廣東省深圳市南山區(qū)茶光路1089號深圳集成電路設計應用產業(yè)園304
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種人母乳干細胞的制備方法及其應用，其中的制備方法包括以下步驟：采集母乳；分離人母乳細胞，得到純化后的母乳細胞懸液；將純化后的母乳細胞懸液轉移到包被體積百分比為0.01?0.05%的明膠的培養(yǎng)板中，置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，每天換液1次，第6天分離單個細胞克隆并接種到新的超低粘附培養(yǎng)板中，促進克隆形成；當細胞融合至80%以上時，添加胰蛋白酶，37℃消化5min，終止消化，收集細胞沉淀，洗滌離心后，用新鮮的細胞培養(yǎng)液重懸細胞，按1:3傳代。采用本發(fā)明的技術方案，操作簡便，無需采用飼養(yǎng)層細胞共培養(yǎng)，而且可以更好的維持人母乳干細胞未分化狀態(tài)，且獲得的人母乳干細胞數(shù)量更多。