長效重組人促紅素的生產方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201711452469.9 申請日 -
公開（公告）號 CN107937425A 公開（公告）日 2018-04-20
申請公布號 CN107937425A 申請公布日 2018-04-20
分類號 C12N15/62;C07K19/00;C07K1/22;C07K1/16 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 程度勝;桑建彬;薛霞;韓明娣;龍應國 申請（專利權）人 北京四環(huán)生物制藥有限公司
代理機構 北京同輝知識產權代理事務所（普通合伙） 代理人 北京四環(huán)生物制藥有限公司
地址 100176 北京市大興區(qū)建安街5號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種長效重組人促紅素的生產方法，包括如下步驟；將人IgG2的Fc片段基因連接到人促紅素基因的3′端，利用脂質體將含有hEPO?Fc重組基因的質粒轉染CHO細胞；CHO細胞用無血清基質經擴增培養(yǎng)，在培養(yǎng)液中分泌表達rhEPO?Fc融合蛋白；培養(yǎng)液經過離心，取上清液，調pH值至3.5?4.0，濾膜過濾除去沉淀物；過濾后含目的蛋白的溶液上rProtein A Beads層析柱進行層析分離，得粗rhEPO?Fc融合蛋白；粗rhEPO?Fc融合蛋白洗脫液用分子篩Superdex 200prep grade進行純化，得精rhEPO?Fc融合蛋白。這種方法成本低，適合工業(yè)化生產。