一種利用啟動(dòng)子編輯創(chuàng)制水稻直鏈淀粉含量變異的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201911392828.5 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN110964743B 公開（公告）日 2021-07-20
申請(qǐng)公布號(hào) CN110964743B 申請(qǐng)公布日 2021-07-20
分類號(hào) C12N15/82;A01H5/10;A01H6/46 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 譚瑗瑗;舒慶堯;周鑫;俞英萍;富昊偉;李友發(fā);汪慶;鄧麗 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 無錫哈勃生物種業(yè)技術(shù)研究院有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海精晟知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 周麗娟
地址 310058 浙江省杭州市西湖區(qū)余杭塘路866號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種利用啟動(dòng)子編輯創(chuàng)制水稻直鏈淀粉含量變異的方法，包括：在啟動(dòng)子區(qū)域選擇兩個(gè)基因編輯靶標(biāo)位點(diǎn)，將靶標(biāo)序列連入雙靶點(diǎn)基因編輯載體，通過農(nóng)桿菌介導(dǎo)轉(zhuǎn)化獲得再生轉(zhuǎn)基因水稻植株。利用潮霉素抗性基因分子標(biāo)記篩選轉(zhuǎn)基因陽性植株，再在靶標(biāo)位點(diǎn)附近設(shè)計(jì)引物，PCR擴(kuò)增后測(cè)序鑒定出在水稻LOC_Os06g04200基因的啟動(dòng)子區(qū)域含兩個(gè)突變位點(diǎn)的基因編輯純合突變單株。通過測(cè)定T1代純合突變單株水稻籽粒直鏈淀粉含量，確定啟動(dòng)子編輯成功創(chuàng)制水稻直鏈淀粉含量變異。本發(fā)明能夠調(diào)節(jié)基因表達(dá)水平而不喪失基因功能，產(chǎn)生的水稻直鏈淀粉含量變異能滿足不同的育種目的和需求。