一種熒光定量PCR檢測(cè)T淋巴細(xì)胞中CAR基因拷貝數(shù)的方法
基本信息
| 申請(qǐng)?zhí)?/td> | CN202010242228.7 | 申請(qǐng)日 | - |
| 公開（公告）號(hào) | CN111334565A | 公開（公告）日 | 2020-06-26 |
| 申請(qǐng)公布號(hào) | CN111334565A | 申請(qǐng)公布日 | 2020-06-26 |
| 分類號(hào) | C12Q1/6851(2018.01)I | 分類 | - |
| 發(fā)明人 | 樊克興;危華峰;衛(wèi)靜 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 | 時(shí)力生物科技（北京）有限公司 |
| 代理機(jī)構(gòu) | 成都華復(fù)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 | 代理人 | 任麗娜 |
| 地址 | 100094北京市海淀區(qū)永豐屯538號(hào)3號(hào)樓130室 | ||
| 法律狀態(tài) | - | ||
摘要
| 摘要 | 本發(fā)明公開了一種熒光定量PCR檢測(cè)T淋巴細(xì)胞中CAR基因拷貝數(shù)的方法，該熒光定量PCR檢測(cè)T淋巴細(xì)胞中CAR基因拷貝數(shù)的方法具體步驟如下：S1：標(biāo)準(zhǔn)品的準(zhǔn)備，使用含CAR基因的質(zhì)粒作為標(biāo)準(zhǔn)品，梯度稀釋為10倍梯度稀釋；S2：提取待測(cè)樣品的DNA；S3：使用引物對(duì)和探針，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)品系列和待測(cè)樣品的DNA進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR反應(yīng)；S4：將待測(cè)樣本的CAR基因的Ct值帶入S3中的標(biāo)準(zhǔn)曲線的計(jì)算公式，通過內(nèi)參基因作為參照，標(biāo)準(zhǔn)化校正基因的含量。本發(fā)明的引物對(duì)、探針或方法的特異性好，靈敏性高，反應(yīng)體系可重復(fù)性好，穩(wěn)定性好，能夠用于制備的CAR?T中CAR拷貝數(shù)的定量檢測(cè)或者CAR?T治療患者外周血細(xì)胞中CAR拷貝數(shù)的定量檢測(cè)。?? |
