哺乳動(dòng)物細(xì)胞表達(dá)載體及其構(gòu)建方法與應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201811470247.4 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN111218476B 公開(公告)日 2021-03-30
申請(qǐng)公布號(hào) CN111218476B 申請(qǐng)公布日 2021-03-30
分類號(hào) C12N15/85(2006.01)I;C12N15/66(2006.01)I 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 張桂濤;李志坤;王勇剛;蘭萬軍;龍婷;林如新;陳靜山 申請(qǐng)(專利權(quán))人 東莞太力生物工程有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州華進(jìn)聯(lián)合專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 崔明思
地址 523560廣東省東莞市常平鎮(zhèn)土塘村
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供一種哺乳動(dòng)物表達(dá)載體,采用SV40核心啟動(dòng)子作為篩選基因的啟動(dòng)子,結(jié)合篩選基因密碼子非最優(yōu)化并以核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的富含A/T的序列代替篩選基因起始密碼子前Kozak序列的設(shè)計(jì),改變篩選基因的翻譯、轉(zhuǎn)錄水平,確保載體上的篩選基因的低水平表達(dá),從而在該載體整合至宿主細(xì)胞的基因組之后,只有整合在適合外源基因高表達(dá)的位置的細(xì)胞株才能存活,不僅能夠有效降低篩選細(xì)胞的數(shù)量,并且能夠提高所篩選得到細(xì)胞株的表達(dá)能力。??