一種液相捕獲文庫構(gòu)建方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202111179418.X 申請日 -
公開（公告）號 CN113774496A 公開（公告）日 2021-12-10
申請公布號 CN113774496A 申請公布日 2021-12-10
分類號 C40B50/10（2006.01）I;C40B40/08（2006.01）I;C40B50/06（2006.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I 分類 組合技術(shù)〔8〕;
發(fā)明人 王永利;賀田芬;鞠巍;湯鏈;徐根明;胡桑 申請（專利權(quán)）人 湖南大地同年生物科技有限公司
代理機構(gòu) 長沙市融智專利事務(wù)所（普通合伙） 代理人 袁靖
地址 410205湖南省長沙市岳麓區(qū)高新區(qū)麓谷企業(yè)廣場E4棟1單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于分子生物學技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種液相捕獲文庫構(gòu)建方法。（1）獲取進行了5’端接頭連接的雙鏈DNA片段，雙鏈DNA片段的長度為100?300bp；（2）加入探針到步驟（1）的體系中捕獲目標區(qū)域；（3）捕獲到的目標區(qū)域DNA單鏈或者cDNA，進行3’端輔助連接，延伸成DNA雙鏈；（4）對于步驟（3）獲得的延伸產(chǎn)物采用通用引物直接進行擴增，得到目標區(qū)域文庫。同傳統(tǒng)技術(shù)方法相比，省掉了構(gòu)建預(yù)文庫的步驟，并且創(chuàng)造性地省掉了傳統(tǒng)技術(shù)中必須要使用的接頭序列封閉寡核苷酸，整個文庫構(gòu)建時間縮短到了6小時以內(nèi)。這樣，不僅使操作流程更簡潔不易出錯，而且極大降低了檢測成本，具有很好的應(yīng)用前景。