利用直接免疫PCR檢測(cè)樣品中污染物含量的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201310755464.9 申請(qǐng)日 -
公開(公告)號(hào) CN103698506A 公開(公告)日 2014-04-02
申請(qǐng)公布號(hào) CN103698506A 申請(qǐng)公布日 2014-04-02
分類號(hào) G01N33/531(2006.01)I;G01N33/558(2006.01)I 分類 測(cè)量;測(cè)試;
發(fā)明人 雷雅靜;陳樞青 申請(qǐng)(專利權(quán))人 杭州仟源愛貝亞檢測(cè)技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 杭州天勤知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 胡紅娟
地址 310052 浙江省杭州市濱江區(qū)濱和路988號(hào)中贏國(guó)際大廈-902/904
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種利用直接免疫PCR檢測(cè)樣品中污染物含量的方法,包括:取待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)品,制備標(biāo)記DNA-標(biāo)準(zhǔn)品偶聯(lián)物;將可與待測(cè)物特異性結(jié)合的抗體固定在支持物上,添加待測(cè)樣品和標(biāo)記DNA-標(biāo)準(zhǔn)品偶聯(lián)物,進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合反應(yīng),反應(yīng)完成后洗滌;洗滌完成后,加入PCR反應(yīng)體系,以標(biāo)記DNA為模板,進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR,得到CT值;根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線,利用CT值計(jì)算待測(cè)樣品中待測(cè)物的含量。本發(fā)明只需“特異抗體包被—競(jìng)爭(zhēng)結(jié)合—PCR擴(kuò)增”三個(gè)步驟即可完成對(duì)環(huán)境樣品中待測(cè)物含量的檢測(cè),并且預(yù)先將待測(cè)物標(biāo)準(zhǔn)品直接與DNA偶聯(lián),抗原抗體特異結(jié)合,大大提高了檢測(cè)靈敏度和準(zhǔn)確性。