多基因捕獲測(cè)序的單鏈探針制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710397693.6 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN107236727B 公開(kāi)（公告）日 2021-09-14
申請(qǐng)公布號(hào) CN107236727B 申請(qǐng)公布日 2021-09-14
分類號(hào) C12N15/10;C12Q1/6811 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王弢;官民曉;巴兆粉;陸亞紅 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 江蘇為真生物醫(yī)藥技術(shù)股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京同恒源知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 趙榮之
地址 215000 江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號(hào)納米科技園C4棟201室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開(kāi)了一種多基因捕獲測(cè)序的單鏈探針制備方法，該方法包括如下步驟：1、芯片合成，2、芯片DNA洗脫，3、用含dUTP的PCR反應(yīng)體系擴(kuò)增芯片DNA，4、PCR產(chǎn)物用磁珠純化，5、使用單引物偏向擴(kuò)增，該引物5’端經(jīng)生物素標(biāo)記，得到含有生物素單鏈與含有dUTP的鏈的雜合雙鏈DNA，6、加入能夠識(shí)別并切除dUTP的酶，將5步中的含有dUTP的母鏈消化，7、消化后產(chǎn)物經(jīng)純化，得到含有生物素標(biāo)記的單鏈探針，8、稀釋至所需濃度并進(jìn)行分裝保存。與市售合成的探針相比，酶法反應(yīng)條件溫和，成本降低，易于推廣。