一種高專一性的測定小RNA的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201110054104.7 申請日 -
公開（公告）號 CN102676637A 公開（公告）日 2012-09-19
申請公布號 CN102676637A 申請公布日 2012-09-19
分類號 C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 譚若穎;吳鴻菲;龔祖塤;丁航海 申請（專利權(quán)）人 上海盛元生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海天翔知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 生元科技有限公司;上海翔瓊生物技術(shù)有限公司
地址 中國香港德輔道中249～253號東寧大廈9樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種高專一性測定小RNA的方法。具體地，本發(fā)明方法包括步驟：(a)在小RNA的3’端添加polyA尾；(b)加入與所述的小RNA的polyA尾部互補或基本互補的引物，進(jìn)行退火；(c)對小RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，形成cDNA；(d)在含有EvaGreen熒光染料的PCR反應(yīng)體系中，對所述cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，從而形成雙鏈DNA-EvaGreen熒光染料復(fù)合物，以及通過檢測擴(kuò)增產(chǎn)物來確定待檢測的小RNA的存在與否和/或數(shù)量。和現(xiàn)有的定量檢測小RNA的方法相比，本發(fā)明方法可顯著提高檢測小RNA(包括非編碼RNA)的專一性。