一種高專(zhuān)一性的測(cè)定小RNA的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201110054104.7 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN102676637B 公開(kāi)（公告）日 2016-02-03
申請(qǐng)公布號(hào) CN102676637B 申請(qǐng)公布日 2016-02-03
分類(lèi)號(hào) C12Q1/68(2006.01)I;G01N21/64(2006.01)I 分類(lèi) 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 譚若穎;吳鴻菲;龔祖塤;丁航海 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 上海盛元生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 上海一平知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 祝蓮君;雷芳
地址 中國(guó)香港德輔道中249～253號(hào)東寧大廈9樓
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種高專(zhuān)一性測(cè)定小RNA的方法。具體地，本發(fā)明方法包括步驟：(a)在小RNA的3’端添加polyA尾；(b)加入與所述的小RNA的polyA尾部互補(bǔ)或基本互補(bǔ)的引物，進(jìn)行退火；(c)對(duì)小RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄，形成cDNA；(d)在含有EvaGreen熒光染料的PCR反應(yīng)體系中，對(duì)所述cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，從而形成雙鏈DNA-EvaGreen熒光染料復(fù)合物，以及通過(guò)檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物來(lái)確定待檢測(cè)的小RNA的存在與否和/或數(shù)量。和現(xiàn)有的定量檢測(cè)小RNA的方法相比，本發(fā)明方法可顯著提高檢測(cè)小RNA(包括非編碼RNA)的專(zhuān)一性。