一種特異的選擇擴(kuò)增及多重PCR方法和應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202210119154.7 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN114369649A 公開（公告）日 2022-04-19
申請(qǐng)公布號(hào) CN114369649A 申請(qǐng)公布日 2022-04-19
分類號(hào) C12Q1/686（2018.01）I;C12Q1/70（2006.01）I;C12R1/93（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 曹玉峰;鄭冉;高青 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 山東見微生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 250000山東省濟(jì)南市高新區(qū)大正路1777號(hào)生物醫(yī)藥園中小企業(yè)產(chǎn)業(yè)化基地5號(hào)樓101廠房和6號(hào)樓105廠房
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種特異的選擇擴(kuò)增及多重PCR方法和應(yīng)用，涉及生物技術(shù)領(lǐng)域。本發(fā)明所述的特異的選擇擴(kuò)增及多重PCR方法包括：以核酸內(nèi)切酶Ⅳ為介導(dǎo)，識(shí)別脫堿基位點(diǎn)并切割特定引物，得到可延伸引物，將可延伸引物用于PCR擴(kuò)增；所述的特定引物是中間引入THF為脫堿基位點(diǎn)，THF兩側(cè)序列與模板互補(bǔ)，3’端封閉，無自由羥基，不能延伸。本發(fā)明提供的多重PCR方法可用于對(duì)生物基因組進(jìn)行多重PCR擴(kuò)增、擴(kuò)增子建庫(kù)的多重靶標(biāo)擴(kuò)增、同時(shí)檢測(cè)多種病原體，以及制備同時(shí)檢測(cè)多種病原體的試劑盒等。很好地解決了多重PCR引物之間的干擾及非特異延伸等關(guān)鍵問題，實(shí)現(xiàn)多重檢測(cè)，靈敏度高，快捷方便，可實(shí)現(xiàn)對(duì)樣本進(jìn)行批量檢測(cè)。