一種利用高通量測(cè)序技術(shù)快速獲得納米抗體的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710124496.7 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN106866821A 公開(kāi)（公告）日 2017-06-20
申請(qǐng)公布號(hào) CN106866821A 申請(qǐng)公布日 2017-06-20
分類(lèi)號(hào) C07K16/18(2006.01)I;C12N15/70(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I;C12Q1/68(2006.01)I 分類(lèi) 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 李福勝;莊文超;李洪利;覃海蘭 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人 康眾（北京）生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京市商泰律師事務(wù)所 代理人 康眾（北京）生物科技有限公司
地址 101111 北京市大興區(qū)北京經(jīng)濟(jì)技術(shù)開(kāi)發(fā)區(qū)科創(chuàng)六街88號(hào)院3號(hào)樓1010-A室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種利用高通量測(cè)序技術(shù)快速獲得納米抗體的方法，所述方法將流式細(xì)胞分選技術(shù)和高通量測(cè)序技術(shù)進(jìn)行結(jié)合，其包括的步驟為：獲得特定蛋白質(zhì)W免疫和未免疫的羊駝外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)；采用流式細(xì)胞分選法獲得針對(duì)特定蛋白質(zhì)W特異的PBMC；提取未免疫、免疫后及分選后PBMC的總RNA，并反轉(zhuǎn)錄成cDNA；以所述的cDNA為模板，通過(guò)兩步法PCR擴(kuò)增獲得抗特定蛋白質(zhì)W的納米抗體的DNA片段；構(gòu)建納米抗體的DNA片段的DNA文庫(kù)，并進(jìn)行高通量測(cè)序分析；分析所述納米抗體的DNA片段的豐度；和將所述納米抗體DNA片段的核苷酸序列構(gòu)建入表達(dá)載體，并使所述納米抗體DNA片段在合適的宿主中表達(dá)。