一種基于高通量測序技術檢測目的微生物基因組RNA的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202010809329.8 申請日 -
公開（公告）號 CN114075596A 公開（公告）日 2022-02-22
申請公布號 CN114075596A 申請公布日 2022-02-22
分類號 C12Q1/6869（2018.01）I;C12Q1/6806（2018.01）I 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 馬珍子;林永權;吳紅龍 申請（專利權）人 南京華大醫(yī)學檢驗所有限公司
代理機構 深圳鼎合誠知識產(chǎn)權代理有限公司 代理人 張海平;彭家恩
地址 518057廣東省深圳市南山區(qū)粵海街道高新區(qū)社區(qū)高新南四道025號高新工業(yè)村W2A棟、B棟A棟201203A5
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明屬于高通量測序和微生物檢測技術領域，具體涉及一種基于高通量測序技術檢測目的微生物基因組RNA的方法。本發(fā)明方法包括對包含目的微生物的待測樣本進行核酸提取、DNA消化、RNA純化、RNA片段化、反轉錄合成cDNA分子、cDNA文庫構建、高通量測序和測序數(shù)據(jù)分析，檢測出樣本中目的微生物基因組RNA的狀況。在DNA消化步驟中，采用DNA酶在37℃至42℃下孵育10至30分鐘的溫和條件下進行消化，并且進一步地，在RNA片段化步驟中采用熱打斷手段。本發(fā)明方法由于采用了溫和的消化手段和熱打斷手段，可以高效、快速、低成本地富集微生物基因組RNA，提高微生物基因組RNA的含量，提高RNA高通量測序文庫構建的成功率，從而提高微生物基因組RNA的檢測靈敏度。