多肽的制備方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202110554938.8 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN113025675B 公開（公告）日 2021-08-20
申請(qǐng)公布號(hào) CN113025675B 申請(qǐng)公布日 2021-08-20
分類號(hào) C12P21/02（2006.01）I;C12P21/06（2006.01）I;C07K14/605（2006.01）I;C07K14/575（2006.01）I;C07K14/635（2006.01）I;C07K1/36（2006.01）I;C07K1/30（2006.01）I;C07K1/22（2006.01）I;C07K1/18（2006.01）I;C07K1/16（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 洪浩;詹姆斯·蓋吉;肖毅;張娜;焦學(xué)成;趙軍旗;王磊;孟翔宇;張慕姣 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 凱萊英醫(yī)藥集團(tuán)（天津）股份有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京康信知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限責(zé)任公司 代理人 金田蘊(yùn)
地址 300457天津市濱海新區(qū)經(jīng)濟(jì)技術(shù)開發(fā)區(qū)洞庭三街6號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種多肽的制備方法。該制備方法包括以下步驟：構(gòu)建Sumo標(biāo)簽融合表達(dá)多肽基因的工程菌株，并誘導(dǎo)工程菌株可溶表達(dá)多肽；從工程菌株中純化得到含有多肽前體的粗蛋白；對(duì)含有多肽前體的粗蛋白采用Ulp1蛋白酶進(jìn)行酶切，切除Sumo標(biāo)簽；采用乙腈結(jié)合加熱沉淀的方法或采用六氟異丙醇沉淀的方法純化Ulp1蛋白酶的酶切產(chǎn)物，得到多肽。本發(fā)明建立了高效的基于可溶性重組表達(dá)藥用多肽或其前體的技術(shù)，建立了基于一步沉淀純化的簡(jiǎn)單純化工藝，進(jìn)一步的結(jié)合HPLC精制即可達(dá)到97%以上多肽純度。