WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒及檢測(cè)方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN200510060040.6 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)(公告)號(hào) CN1282750C 公開(kāi)(公告)日 2006-11-01
申請(qǐng)公布號(hào) CN1282750C 申請(qǐng)公布日 2006-11-01
分類(lèi)號(hào) C12Q1/68(2006.01);C12Q1/25(2006.01) 分類(lèi) 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王忠發(fā);邵俊斌;王建躍;沃健兒;何偉賢;薛憶 申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人 杭州博康生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 舟山固浚專(zhuān)利事務(wù)所 代理人 舟山市疾病預(yù)防控制中心;杭州博康生物科技有限公司
地址 316000浙江省舟山市定海區(qū)解放西路231號(hào)
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 已用于WSSV診斷的FQ-PCRe有耗時(shí)較長(zhǎng),存在非特異擴(kuò)增產(chǎn)物或引物二聚體導(dǎo)致的假陽(yáng)性結(jié)果缺陷。TaqMan PCR有更高的靈敏性和高精確性,但尚未應(yīng)用于WSSV的診斷。本發(fā)明提供的WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒和方法,試劑盒中所裝的即檢測(cè)方法中所用反應(yīng)體系中有2×TaqMan Buffer液、特異性引物-1、特異性引物-2、TaqMan探針等等;PCR儀中的DNA操作過(guò)程是先作93℃下預(yù)變性2分鐘;再作93℃下變性5秒鐘、60℃下退火延伸30秒鐘、60℃下單點(diǎn)熒光檢測(cè)的循環(huán)40次。本發(fā)明提供的WSSV的FQ-PCR診斷試劑盒和方法,配備了所有無(wú)法從市場(chǎng)上購(gòu)得所需的各種試劑;達(dá)到了高靈敏度、高重復(fù)性、高特異性的指標(biāo),另外還有所需待測(cè)樣本數(shù)量要求低和檢測(cè)所需時(shí)間短的特點(diǎn)。