一種CAR-NK細胞及其制備方法與應用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710626029.4 申請日 -
公開（公告）號 CN108300698B 公開（公告）日 2020-07-03
申請公布號 CN108300698B 申請公布日 2020-07-03
分類號 C12N5/10;C12N15/867;C12N15/62;A61K35/17;A61P35/00 分類 -
發(fā)明人 王旭;李陶;林詞雄;林潔璇;朱剛 申請（專利權(quán)）人 沃昕生物科技（深圳）有限公司
代理機構(gòu) 北京睿派知識產(chǎn)權(quán)代理事務所（普通合伙） 代理人 沃昕生物科技（深圳）有限公司;深圳市泰華細胞工程有限公司
地址 518000 廣東省深圳市寶安區(qū)新安街道興東社區(qū)67區(qū)大仟工業(yè)廠區(qū)宿舍105、106
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種CAR?NK細胞及其制備方法與應用，包括：S1：合成CAR序列；S2：將其整合進慢病毒目的載體質(zhì)粒中，得到目的質(zhì)粒；S3：將目的質(zhì)粒與293T細胞混合并進行培養(yǎng)，收集病毒液，濃縮，得目的質(zhì)粒的病毒濃縮液；S4：收集自體血漿以及外周血單個核細胞PBMC，用活化培養(yǎng)基調(diào)整細胞密度并進行細胞培養(yǎng)；轉(zhuǎn)移到新的細胞培養(yǎng)袋中繼續(xù)培養(yǎng)，并補充增殖培養(yǎng)基；培養(yǎng)完畢后得到NK細胞；S5：在NK細胞中加入目的質(zhì)粒的病毒濃縮液進行孵育，得到CAR?NK細胞。本發(fā)明的CAR?NK細胞具有非常強的因子分泌能力和抑瘤能力，且制備CAR?NK細胞的轉(zhuǎn)染方法高效、穩(wěn)定。