一種臍血Treg細(xì)胞的體外擴(kuò)增方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201710582097.5 申請日 -
公開(公告)號 CN107164324B 公開(公告)日 2020-03-27
申請公布號 CN107164324B 申請公布日 2020-03-27
分類號 C12N5/0783 分類 生物化學(xué);啤酒;烈性酒;果汁酒;醋;微生物學(xué);酶學(xué);突變或遺傳工程;
發(fā)明人 林詞雄;王旭;李陶;林潔璇;朱剛 申請(專利權(quán))人 沃昕生物科技(深圳)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京睿派知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 代理人 沃昕生物科技(深圳)有限公司;深圳市泰華細(xì)胞工程有限公司
地址 518000 廣東省深圳市寶安區(qū)新安街道興東社區(qū)67區(qū)大仟工業(yè)廠區(qū)宿舍105、106
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及一種臍血Treg細(xì)胞的體外擴(kuò)增方法,包括以下步驟;S1:從分離單個核細(xì)胞;S2:調(diào)整細(xì)胞密度,接種至培養(yǎng)瓶,添加滅活血漿;第一天:加入擬雌內(nèi)酯、TGF?β、CD3/CD28單克隆抗體和IL?2;S3:第四天:補(bǔ)加培養(yǎng)基,并添加滅活血漿、擬雌內(nèi)酯和TGF?β并使其終濃度保持不變;S4:第六天:補(bǔ)加培養(yǎng)基,并使其他成分的終濃度均保持不變;S5:第九天:補(bǔ)加培養(yǎng)基,并并使其他成分的終濃度均保持不變;S6:第十二天:收集細(xì)胞。該方法采用擬雌內(nèi)酯+TGF?β共同作用誘導(dǎo)CD4+CD25+Tregs的擴(kuò)增,擴(kuò)增效率高,無需預(yù)先純化便可得到高純度的Treg細(xì)胞。