一種檢測(cè)嵌合抗原受體或基因修飾的T細(xì)胞受體表達(dá)的方法和應(yīng)用

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710464896.2 申請(qǐng)日 -
公開(kāi)（公告）號(hào) CN107254489B 公開(kāi)（公告）日 2021-06-18
申請(qǐng)公布號(hào) CN107254489B 申請(qǐng)公布日 2021-06-18
分類號(hào) C12N15/867;C07K14/705;A61K35/17;A61P35/00 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 韋丹;付蘇雷;連杰;趙禮軍;李德志 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 河南省華隆生物技術(shù)有限公司
代理機(jī)構(gòu) 北京品源專利代理有限公司 代理人 鞏克棟
地址 453000 河南省新鄉(xiāng)市新飛大道1789號(hào)高新區(qū)火炬園
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明涉及免疫學(xué)和分子生物學(xué)領(lǐng)域，具體涉及一種檢測(cè)嵌合抗原受體或基因修飾的T細(xì)胞受體表達(dá)的方法和應(yīng)用，所述方法主要包括以下步驟：（1）將包裝好的CAR或TCR慢病毒侵染貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞，獲得表達(dá)CAR或TCR的穩(wěn)定轉(zhuǎn)染貼壁細(xì)胞或懸浮細(xì)胞；（2）將貼壁細(xì)胞鋪板，待貼壁細(xì)胞的融合度達(dá)到70?90％時(shí)，加入相應(yīng)的懸浮細(xì)胞；（3）繼續(xù)培養(yǎng)并收集上清，對(duì)懸浮在上清中的細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)并觀察懸浮細(xì)胞與貼壁細(xì)胞結(jié)合現(xiàn)象。本發(fā)明的檢測(cè)嵌合抗原受體或基因修飾的T細(xì)胞受體表達(dá)的方法不但能判定CAR或TCR是否正確表達(dá)，還能證明已表達(dá)的CAR或TCR能否與相應(yīng)的腫瘤抗原特異性結(jié)合，進(jìn)一步提高了CAR或TCR表達(dá)檢測(cè)的準(zhǔn)確率，為腫瘤免疫治療提供進(jìn)一步的保障。