一種末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶TdT的純化方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202111661797.6 申請日 -
公開（公告）號 CN114317486A 公開（公告）日 2022-04-12
申請公布號 CN114317486A 申請公布日 2022-04-12
分類號 C12N9/12（2006.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 王緒德;楊暢;李信志;劉義;雷文龍;趙紅洲 申請（專利權(quán)）人 武漢賽維爾生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 孫鳳俠
地址 430200湖北省武漢市東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新二路388號武漢光谷國際生物醫(yī)藥企業(yè)加速器1.2期22棟5層2室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶TdT的純化方法。該方法針對末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶TdT的純化進(jìn)行了大量研究，根據(jù)蛋白的性質(zhì)探究出了最影響該蛋白收率和純度的關(guān)鍵影響因素，包括蛋白洗脫液、純化方式、洗脫收集等，所述蛋白洗脫液中含有20～25mM咪唑、10～25mM Trisbase和0.4～0.5M NaCl，pH為7.5～8.0；并進(jìn)行了系統(tǒng)性的設(shè)計(jì)和優(yōu)化，所提出的方案可以顯著提升蛋白的得率和純度，且無核酸殘留；而且本發(fā)明純化策略方便進(jìn)一步等比放大，能夠大規(guī)模量產(chǎn)，在生產(chǎn)高純度、無核酸殘留、品質(zhì)好的末端脫氧核糖核苷酸轉(zhuǎn)移酶TdT蛋白方面具有很好的應(yīng)用價值。