一種動(dòng)物組織裂解與直接PCR擴(kuò)增的方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN202111648074.2 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN114350653A 公開（公告）日 2022-04-15
申請(qǐng)公布號(hào) CN114350653A 申請(qǐng)公布日 2022-04-15
分類號(hào) C12N15/10（2006.01）I;C12Q1/686（2018.01）I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 吝婷婷;陳賢軍;馮飛;王緒德;趙紅洲 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 武漢賽維爾生物科技有限公司
代理機(jī)構(gòu) 廣州粵高專利商標(biāo)代理有限公司 代理人 段卉
地址 430200湖北省武漢市東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新二路388號(hào)武漢光谷國際生物醫(yī)藥企業(yè)加速器1.2期22棟5層2室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種動(dòng)物組織裂解與直接PCR擴(kuò)增的方法。裂解液成分包括：10～200mM Tris（pH 8.0）、5～10mM EDTA、質(zhì)量濃度0.1％～0.25％SDS、質(zhì)量濃度1％～5％DTT和100～500μg/mL蛋白酶K組成的混合液，采用10～200mM KCl作為裂解終止液，終止裂解液與裂解液之間的體積比為1～2：1～1.5。還提供了一種與裂解液配套的PCR增強(qiáng)劑：1～5M甜菜堿、1％～10％DMSO和0.001％～0.15％明膠，提高PCR擴(kuò)增效率。本發(fā)明使組織裂解產(chǎn)物直接作為PCR反應(yīng)模板，省去繁瑣步驟，節(jié)省時(shí)間與成本，減少樣本損失，實(shí)現(xiàn)高通量快速檢測(cè)。