基因DNA序列捕獲探針的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201410064762.8 申請日 -
公開（公告）號 CN103898210A 公開（公告）日 2014-07-02
申請公布號 CN103898210A 申請公布日 2014-07-02
分類號 C12Q1/68(2006.01)I;C12N15/11(2006.01)I;C12N15/10(2006.01)I 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 譚海芹;洪旭濤;余文菁;張珊珊;余科;宓婭娜 申請（專利權(quán)）人 紹興銳創(chuàng)生物科技有限公司
代理機構(gòu) 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 代理人 紹興銳創(chuàng)生物科技有限公司
地址 312071 浙江省紹興市袍江群賢路與中興大道交叉口東南角5樓501室
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種基因DNA序列捕獲探針的制備方法，技術(shù)方案為：1）、設(shè)計兩條部分互補的引物，經(jīng)退火處理后形成一個部分雙鏈結(jié)構(gòu)的開叉形接頭，與目標(biāo)基因的普通PCR擴增產(chǎn)物（A1）進行連接反應(yīng)，得到兩端帶有接頭的目標(biāo)基因（A2）；2）、針對接頭序列設(shè)計相應(yīng)的引物，對所述A2進行擴增，得到帶有T7啟動子的擴增產(chǎn)物（A3）；3）、對上述產(chǎn)物（A3）進行定量后，在一定的條件下，加入帶有生物素標(biāo)記的NTP(其中UTP上標(biāo)記生物素，其他ATP，CTP，GTP不標(biāo)記)，進行體外轉(zhuǎn)錄反應(yīng)，最終得到帶有生物素標(biāo)記的RNA探針（基因DNA序列捕獲探針）。