一種NK細(xì)胞體外擴(kuò)增方法

基本信息

申請(qǐng)?zhí)?/td> CN201710375838.2 申請(qǐng)日 -
公開（公告）號(hào) CN106967682B 公開（公告）日 2020-08-07
申請(qǐng)公布號(hào) CN106967682B 申請(qǐng)公布日 2020-08-07
分類號(hào) C12N5/0783 分類 -
發(fā)明人 姚玲玲;楊苗;楊敏;孟得龍;宋丹;劉得娟 申請(qǐng)（專利權(quán)）人 北京煥生匯生物技術(shù)研究院有限公司
代理機(jī)構(gòu) 西安中科匯知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 代理人 北京煥生匯生物技術(shù)研究院
地址 100041 北京市石景山區(qū)實(shí)興大街30號(hào)院3號(hào)樓10層1002房間
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種NK細(xì)胞體外擴(kuò)增方法，包括：(1)配制主要成分為50ng/ml抗CD3單克隆抗體+50ng/ml抗CD16單克隆抗體的試劑A、主要成分為300IU/ml IL?2的試劑B和主要成分為20ng/ml IL?12+20ng/ml IL?15的試劑C，準(zhǔn)備淋巴細(xì)胞分離液40ml作為試劑D；(2)取試劑A于T?175培養(yǎng)瓶包被，4℃過夜；(3)處理外周血，得到細(xì)胞和血清；(4)重懸細(xì)胞，添加試劑D后離心收集PBMC；(5)將PBMC重懸于X?VIVO15培養(yǎng)基中，添加試劑B、試劑C和自體血清，孵育；(6)分別在第3、6、9、12天補(bǔ)加培養(yǎng)基、試劑B、試劑C和自體血清，第14天收集細(xì)胞。本發(fā)明的有益之處在于：通過提前接種抗CD3單克隆抗體和抗CD16單克隆抗體，先對(duì)細(xì)胞進(jìn)行篩選，所以在體外培養(yǎng)時(shí)提高了NK細(xì)胞的擴(kuò)增倍數(shù)和純度。