一種CRISPR/Cpf1基因編輯系統(tǒng)及其構(gòu)建方法和在赤霉菌中的應(yīng)用

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202110965413.3 申請日 -
公開（公告）號 CN113584033B 公開（公告）日 2022-07-01
申請公布號 CN113584033B 申請公布日 2022-07-01
分類號 C12N15/113（2010.01）I;C12N9/22（2006.01）I;C12N15/80（2006.01）I;C12N15/65（2006.01）I;C12N1/15（2006.01）I;C12P27/00（2006.01）I;C12R1/645（2006.01）N;CN 112760338 A,2021.05.07 Tian-Qiong Shi et al..CRISPR/Cas9-Based Genome Editing in the Filamentous Fungus Fusarium fujikuroi and Its Application in Strain Engineering for Gibberellic Acid Production..《ACS Synth Biol.》.2019,第8卷（第2期）,445-454.;李丹丹.基于CRISPR系統(tǒng)的絲狀真菌基因組快速編輯.《中國優(yōu)秀碩士學位論文全文數(shù)據(jù)庫基礎(chǔ)科學輯》.2019,A006-301.;肖晗 等.CRISPR-Cas系統(tǒng)編輯絲狀真菌的進展與挑戰(zhàn).《合成生物學》.2021,第2卷（第2期）,274-286. 分類 生物化學；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學；酶學；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 黃和;施天穹;楊彩玲;沈琦;彭倩倩 申請（專利權(quán)）人 南京師范大學
代理機構(gòu) 南京蘇高專利商標事務(wù)所（普通合伙） 代理人 -
地址 210046江蘇省南京市棲霞區(qū)文苑路1號
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開了一種CRISPR/Cpf1基因編輯系統(tǒng)及其構(gòu)建方法和在赤霉菌中的應(yīng)用，該系統(tǒng)為骨架質(zhì)粒pCpf1Ff?DR，包括Fncpf1基因、功能性crRNA基因、啟動子pGPD、啟動子pTRPC、強RNA聚合酶III型啟動子5srRNA、潮霉素篩選標記hph。本發(fā)明系統(tǒng)效率高、通用性強、易于操作而被迅速應(yīng)用于絲狀真菌赤霉菌中，通過該基因編輯系統(tǒng)可用于赤霉菌中實現(xiàn)長達17kb的比卡菌素基因簇的敲除。本發(fā)明首次在赤霉菌中實現(xiàn)大片段基因敲除，且首次發(fā)現(xiàn)比卡菌素基因簇敲除有利于提高赤霉素產(chǎn)量，該方法有望進一步用于改造赤霉素工業(yè)菌，縮短菌株升級的時間，為提高赤霉素產(chǎn)量、增加經(jīng)濟效益提供了強有力保障。