一種制備重組人奧克纖溶酶原的制備方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN202210051760.X 申請日 -
公開（公告）號 CN114437953A 公開（公告）日 2022-05-06
申請公布號 CN114437953A 申請公布日 2022-05-06
分類號 C12N1/19（2006.01）I;C12N1/38（2006.01）I;C07K14/39（2006.01）I;C12N9/68（2006.01）I;C12N9/72（2006.01）I;C12R1/84（2006.01）N 分類 生物化學(xué)；啤酒；烈性酒；果汁酒；醋；微生物學(xué)；酶學(xué)；突變或遺傳工程;
發(fā)明人 彭紅衛(wèi);汪露 申請（專利權(quán)）人 成都景澤生物制藥有限公司
代理機(jī)構(gòu) 成都高遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所（普通合伙） 代理人 魏靜;張娟
地址 230000安徽省合肥市創(chuàng)新大道2800號創(chuàng)新產(chǎn)業(yè)園二期J1棟A座13層A11-1
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明提供了一種制備重組人奧克纖溶酶原的方法，屬于發(fā)酵領(lǐng)域。該方法包括以下步驟：（1）種子活化與擴(kuò)增：將表達(dá)重組纖溶酶原的畢赤酵母工程菌活化，擴(kuò)增，得到種子液；（2）發(fā)酵：將種子液接種至發(fā)酵培養(yǎng)基，進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，當(dāng)發(fā)酵液中細(xì)胞濕重大于等于180g/L，同時溶解氧大于等于100％時，加入誘導(dǎo)劑進(jìn)行誘導(dǎo)，同時加入由質(zhì)量比為1：（1～4）的酵母粉和蛋白胨組成的氮源，誘導(dǎo)表達(dá)35～75小時，終止發(fā)酵；（3）收集發(fā)酵上清，分離提純得到重組纖溶酶原。本發(fā)明的發(fā)酵工藝不僅能夠顯著提高重組人奧克纖溶酶原的表達(dá)量，還能明顯減少重組人奧克纖溶酶原的降解，有效提高蛋白的產(chǎn)量，適合工業(yè)化生產(chǎn)。