一種采用大腸桿菌表達(dá)串聯(lián)序列制備GLP-1或其類似物多肽的方法

基本信息

申請?zhí)?/td> CN201911373533.3 申請日 -
公開（公告）號 CN111072783A 公開（公告）日 2020-04-28
申請公布號 CN111072783A 申請公布日 2020-04-28
分類號 C07K19/00;C07K14/605;C12N15/62;C12N15/70;C12N1/21;C12R1/19 分類 有機(jī)化學(xué)〔2〕;
發(fā)明人 辛中帥;趙珊珊;文良柱;平康康;徐曉峰;李夷平 申請（專利權(quán)）人 萬新醫(yī)藥科技（蘇州）有限公司
代理機(jī)構(gòu) - 代理人 -
地址 215123 江蘇省蘇州市蘇州工業(yè)園區(qū)星湖街218號生物納米園A4-213單元
法律狀態(tài) -

摘要

摘要 本發(fā)明公開一種采用大腸桿菌表達(dá)串聯(lián)序列制備GLP?1或其類似物多肽的方法，本發(fā)明設(shè)計(jì)的GLP?1或其類似物的重組串聯(lián)蛋白通式為：X?(Y?Z)n。其中：X為前導(dǎo)肽，Y為胰蛋白酶和CPB酶雙酶切位點(diǎn)或Kex2酶和CPB酶雙酶切位點(diǎn)及輔助序列，Z為GLP?1或其類似物。n為串聯(lián)重復(fù)數(shù)。通過大腸桿菌原核表達(dá)體系進(jìn)行發(fā)酵誘導(dǎo)表達(dá)GLP?1或其類似物的重組串聯(lián)蛋白形成的包涵體無需變性劑即可完全溶解，溶解液經(jīng)胰蛋白酶和CPB酶雙酶切或Kex2酶和CPB酶雙酶切獲得GLP?1或其類似物。本方法獲得的GLP?1或其類似物表達(dá)量高，酶切后GLP?1目的蛋白收率及酶切后純度高。